@MASTERSTHESIS{ 2021:690047514,
 	title = {Diagnóstico viral e limpeza clonal de matrizes de maracujazeiro (Passiflora edulis Sims) utilizadas na produção de sementes híbridas},
 	year = {2021},
 	url = "https://tede.ufam.edu.br/handle/tede/8170",
 	abstract = "Este trabalho teve por objetivo realizar o diagnóstico viral e a limpeza clonal de matrizes de
 maracujazeiro (Passiflora edulis Sims) utilizadas na produção de sementes híbridas. Para a realização
 do diagnóstico viral, folhas dos genótipos CPMSC1, CPGA1, MR1, CPMGA2 e CPF1SSBR foram
 coletadas e o RNA e DNA extraídos para a detecção viral por RT-PCR e PCR, utilizando primers que
 codificam regiões genômicas de Cowpea aphid-borne mosaic virus (CABMV), Lettuce chlorosis virus
 (LCV) e Begomovirus. Complementarmente, os resultados obtidos para os primers de CABMV foram
 hibridizados por Southern blot para um diagnóstico mais confiável. Os resultados revelaram a presença
 de CABMV em 100% das amostras de todas as matrizes testadas. Além disso, amostras de CPGA1
 (17%) e de CPMSC (11%) foram positivas utilizando os primers universais de begomovírus. Nenhuma
 amostra foi positiva para LCV. Num segundo experimento, um protocolo para a micropropagação dos
 genótipos foi desenvolvido, visando a posterior multiplicação das matrizes oriundas da limpeza clonal.
 Para tanto, inicialmente foi avaliado o melhor explante para a fase de o estabelecimento e multiplicação
 in vitro. Verificou-se que o desenvolvimento de gemas preexistentes foi observado apenas nas
 microestacas, em relação à inoculação de gemas isoladas, gerando brotos com tamanho médio de 7 mm
 após 45 dias de cultivo. Em seguida, apenas as microestacas foram utilizadas em novo experimento para
 o estabelecimento in vitro em meio de MS acrescido de 4,43 μM de BAP. Nele, observou-se o
 desenvolvimento de brotos com pelo menos 6 mm após 30 dias de cultivo. O material proveniente destas
 microestacas foi utilizado para os demais experimentos de multiplicação, alongamento e enraizamento.
 Por fim, para testar a eficiência da cultura de ápices caulinares na eliminação do CABMV nas matrizes
 previamente diagnosticadas, ápices caulinares (0,1 - 0,3 mm) foram isolados e inoculados em meio de
 MS acrescido de 0,05 μM de ANA, 0,44 μM de BAP e 0,28 μM de AG3. Após a regeneração do
 meristema apical, os explantes foram transferidos para meio de MS acrescido de 4,43 μM de BAP para
 indução de proliferação de gemas e multiplicação. Agregados de gemas provenientes da cultura de
 ápices caulinares foram utilizados para indexação do material vegetal para o vírus CABMV por meio
 de RT-PCR. Os resultados observados demonstraram diminuição na intensidade das bandas referentes
 ao CABMV nos genótipos CPGA1, MR1 e CPMGA2, indicando diminuição de carga viral. Por fim, a
 limpeza viral foi observada em apenas uma amostra do genótipo CPGA1.",
 	publisher = {Universidade Federal do Amazonas},
 	scholl = {Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia},
 	note = {Instituto de Ciências Biológicas}
}