@MASTERSTHESIS{ 2015:1839374777, title = {Produção de proteases neutras de cogumelos para aplicação na indústria de detergente}, year = {2015}, abstract = "Proteases são enzimas comercialmente importantes e dentre as fontes desses biocatalizadores estão os basidiomicetos. A utilização destas nos diferentes segmentos industriais é o fator essencial que contribui para busca de proteases com novas propriedades. O objetivo deste trabalho foi investigar a atividade proteolítica de quatro espécies de cogumelos da Coleção de Cultura DPUA para avaliar mecanismos regulatórios da espécie produtora de altos níveis de protease para aplicação industrial. Auricularia mixotricha DPUA 1695, Ganoderma lucidum DPUA 1694, Lentinus citrinus DPUA 1693 e Pleurotus ostreatoroseus DPUA 1720 foram investigados quanto à produção de proteases em meio GYP [(glicose 2% (p/v) + peptona 1% (p/v) + extrato de levedura 0,5% (p/v)]. Na determinação da influência de diferentes parâmetros na síntese enzimática, fontes de carbono, nitrogênio, tamanho do inóculo, tempo de cultivo e volume do meio foram estudados. Para verificação da influência de substrato indutor (gelatina e extrato de levedura), idade do inóculo e pH inicial foi realizado um planejamento fatorial completo 24, com 4 pontos centrais. Na determinação do pH ótimo, soluções tampão 0,1 M foram utilizadas: citrato (pH 4-6), fosfato ( pH 6-8) e carbonatobicarbonato de sódio (pH 9-10). O efeito da temperatura na atividade proteolítica foi avaliado nas temperaturas 30, 40, 50, 60, 70 e 80 °C. O efeito de íons metálicos e inibidores foi determinado utilizando CaCl2, KCl, NaCl, CuSO4, FeSO4, MgSO4 e ZnSO4, EDTA, PMSF, pepstatina e ácido iodoacético. A eficiência da protease na remoção de manchas foi realizada utilizando tecidos de algodão manchados com polpa de açaí, suco de couve e suco V8 vegetais®. No teste de compatibilidade do extrato bruto com detergentes comerciais foi utilizado Ace®, Ariel®, Minuano® e Omo®. P. ostreatoroseus DPUA 1720 apresentou maior quantitativo enzimático, sendo a espécie selecionada para determinação da influência de diferentes parâmetros na síntese enzimática. A maior produção de protease foi verificada utilizando 5 discos miceliais como inóculo em 40 mL do meio AYG [amido 2% (p/v) + extrato de levedura 0,5% (p/v) + gelatina 1% (p/v)], durante sete dias. No planejamento fatorial a máxima atividade obtida foi verificada no ensaio contendo amido 2% (p/v) + gelatina 0,5% (p/v) + extrato de levedura 1% (p/v), pH 8 e inóculo com 16 dias de cultivo. As proteases apresentaram atividade máxima em pH 7,0 a 50 oC, sendo estáveis por 1h entre pH 7 a 9 e de 30 a 50 oC. Íons Fe2+ estimularam a atividade, enquanto ions K+, EDTA, PMSF e ácido iodoacético inibiram, indicando ser metalo, serino e cisteino-proteases. O extrato bruto foi eficaz na remoção de mancha de açaí e apresentou compatiblidade com Minuano®. As características destas enzimas como pH e temperatura ótima, compatibilidade e estabilidade, permitem sua utilização como aditivos na indústria de detergentes", publisher = {Universidade Federal do Amazonas}, scholl = {Programa de Pós-graduação em Diversidade Biológica}, note = {Instituto de Ciências Biológicas} }